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A citometria de fluxo é um método de análise de células de alto rendimento que utiliza luz monocromática e detectores especificamente angulados para inferir o tamanho, a granularidade e a complexidade da célula com base no grau de dispersão de luz realizado.

As células também podem ser preparadas para medições de fluorescência durante a citometria de fluxo, incorporando fluoróforos, moléculas fluorescentes com adsorção específica e comprimentos de onda de emissão, permitindo que vários marcadores não sobrepostos sejam usados. A citometria de fluxo pode ser utilizada em odontologia para examinar células coletadas da cavidade oral: gengivas, língua, úvula, palato duro e mole, etc., incluindo células bacterianas.

O uso precoce da citometria de fluxo na odontologia

Mangkornkarn et ai . (1991) examinaram o tecido da polpa dentária em um estudo pioneiro, onde a citometria de fluxo permite uma melhor reflexão da dinâmica celular do que os métodos clássicos anteriormente empregados, onde seções estáticas de tecido são preparadas. As células foram coradas com anticorpos monoclonais para subpopulações de linfócitos, demonstrando a viabilidade da citometria de fluxo na determinação da heterogeneidade celular do tecido pulpar.

Os primeiros passos no uso da citometria de fluxo de fluorescência na identificação de bactérias orais foram realizados por Barnett et al. (1984), onde, apesar de exibir características distintas de dispersão de luz, Streptococcus mutans e Actinomyces viscosus demonstraram uma diferença insuficiente na morfologia celular para permitir a identificação confiável por citometria de fluxo na época, com os autores utilizando anticorpos imunofluorescentes específicos da espécie para obter a separação.

A citometria de fluxo moderna pode avaliar vários parâmetros simultaneamente e é usada regularmente tanto em pesquisa quanto em odontologia clínica. Na pesquisa, a citometria de fluxo é útil para avaliar o impacto de novos medicamentos ou materiais antibacterianos, como agentes de união dentinária (Lapinska et al ., 2019), examinando o estado e a composição celular dos tecidos orais em estados de doença e uma ampla variedade de outros investigações específicas para as quais a análise multiparamétrica de células de alto rendimento seria útil. A citometria de fluxo pode ser utilizada na clínica como método diagnóstico para várias doenças, onde a contagem de leucócitos ou outros biomarcadores indicativos podem ser contados e comparados.

Vários grupos de pesquisa demonstraram a criopreservação de células-tronco da polpa dentária humana e a subsequente citometria de fluxo, possibilitando o arquivamento de amostras a longo prazo (Malekfar et al ., 2016). Isso pode ser útil no estudo de longo prazo de estados de doença e para estudos de comparação intra e inter-pacientes, particularmente na preservação de células-tronco valiosas. As células-tronco são regularmente identificadas e categorizadas de maneira de alto rendimento usando citometria de fluxo e podem ser coletadas da polpa dentária no centro do dente para uso em pesquisa e medicina (Bakkar et al ., 2017).

O que a citometria de fluxo pode nos dizer sobre nossa dieta?

A citometria de fluxo também tem aplicações em odontologia relacionada à ciência de alimentos. Por exemplo, Chang et ai . (2012) utilizaram citometria de fluxo para examinar fibroblastos gengivais humanos sob exposição ao butirato, um produto metabólico de ácidos graxos de cadeia curta da digestão de micróbios intestinais da fibra alimentar. Curiosamente, o butirato inibiu o crescimento de fibroblastos gengivais pela parada do ciclo celular sem induzir apoptose, produzindo um efeito tóxico ao produzir espécies reativas de oxigênio. Isso pode resultar no prolongamento da inflamação nas doenças periodontais, confundindo os já debatidos benefícios para a saúde do butirato (Liu et al ., 2018).

Um estudo recente de Onyango et al. (2020) explora a comunidade de bactérias orais “profundamente diferentes” e o perfil metabólico após a exposição a vários açúcares: sacarose, trealose, kojibiose e xilitol, descobrindo que os dois últimos suportam menos espécies associadas à cárie dentária. Kojibiose, em particular, mostrou manter de perto a composição da comunidade bacteriana do status quo devido à sua baixa disponibilidade para o metabolismo bacteriano.

Kojibiose é um dissacarídeo com sabor doce, o que significa que menos calorias de açúcar são necessárias para fornecer uma doçura igual. Está presente no mel, mas é difícil de sintetizar em escala industrial, embora uma abordagem bioquímica recente utilizando enzimas para produzir o açúcar a partir de um material de partida prontamente fabricado possa permitir que ele seja incorporado mais regularmente em alimentos no lugar de alternativas mais calóricas. Diez-Municio et al ., 2013).

Artigo Retirado de News Medical.

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